ESC 2015：三維心肌干細胞培養技術
體外細胞培養技術已成為細胞生物學藥學、毒理學、干細胞、系統生物學和新藥創制等領域必不可少的工具。傳統平板細胞培養方法使細胞單層生長于二維環境，不能產生體內的細胞外基質屏障，且細胞表型也異于原代細胞。而三維細胞培養技術通過模擬機體內細胞生長的生理微環境，具有細胞培養直觀性和條件可控性的優勢，故其在再生醫學應用方面有著非常大的發展潛力。
目前，有一種具有治療心肌梗死前景的技術叫做外源性生物組織補片技術。理論上，可以利用該技術在體外構建工程化心肌組織，然后植入梗死的心臟。該技術可以攻克心肌成形術的一些缺點，如：細胞停留時間短、注入后細胞存活率低、心肌樣細胞分化率低。細胞功能性融合等特點。
在此次?ESC?2015?大會上，來自上海心血管疾病研究所的白英楠等人使用心肌干細胞和介觀水凝膠模型，在?3?D?環境中培養?c-kit?陽性的小鼠心肌干細胞?（CSC）?以形成心臟組織補片。通過這種微制作組織模型（Nat?Protoc．2009；4?(10)：1522–1534），制造出了個體化的組織網絡和組織補片。
其實驗過程如下：
1.?分離?c-kit?陽性的?CSC?，傳代培養。
2.?4萬個?CSC?懸于5?ml?的去白血病生長因子干細胞培養基中培養，每?2-3?天換液一次。團塊會在?3-4?天后形成。
3.?然后將這些細胞與包含人工基底膜的纖維蛋白匯合加入微制作組織模型，以形成組織補片。
4.?將每塊補片進入含?6?-氨基己酸的無血清培養基中，在該培養基中培養?14?天，每兩天換液一次。
5.?14?天培養之后，測試補片的功能。
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