乳腺癌BA46基因轉染樹突狀細胞誘導特異細胞免疫
發布日期：2007-09-22 16:50 文章來源：丁香園
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關鍵詞： 乳腺癌
細胞免疫
CSCO
腫瘤學大會
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??? (三) FACS分析兩組DC表面標志表達情況（圖3）
??? FACS 結果顯示，基因轉移組DC 共刺激因子CD80（B7-1）、CD86（B7-2）以及CD40 的表達比例分別為78%、83%、79%，均明顯高于對照組DC的15%、64%、53%。
??? (四) FACS分析兩組DC激活的T細胞中CD8/CD4和CD8/CD56情況（圖4）FACS分析兩組DC激活的T細胞亞群中，基因轉移組的CD8/CD4和CD8/CD56分別為3.24 和5.54均明顯高于對照組DC激活的T細胞的1.12 和0.78。
??? (五) 51Cr 釋放法測量DC激活的T細胞的殺傷效率：DC激活的T細胞的細胞毒試驗結果（表1）
??? 由表1 可知，基因轉移組T細胞對BA46陽性的靶細胞Hs578T有明顯的殺傷（48.5%），而對照組T細胞無明顯殺傷（7.8%），兩者比較有顯著性差異。而且，當加入MHCI類抗體W6/32 時，基因轉移組T細胞對Hs578T 的殺傷率明顯下降，僅為12.3%，說明此殺傷具有MHC 限制性；當靶細胞是K562 時，該T細胞對其殺傷也是較少的，僅為8.2%，說明了此基因轉移組T細胞Hs578T的殺傷是特異的。
??? 三、 討論
??? 乳腺癌是女性發病率最高的惡性腫瘤，DC瘤苗有望成為該病一種全新的治療手段，已有采用DC瘤苗治療乳腺癌的臨床試驗正在進行之中[6]。制備DC瘤苗的方法常用有抗原肽直接沖擊和抗原基因轉移等方法，而抗原肽直接沖擊法存在一定的不足：(1)抗原肽有一定的半衰期(比如t1/2[Her-2/neu]≤30min)，不利于多次刺激；(2)目前使用的抗原肽大多來源于細菌表達的基因工程產品，此類蛋白缺少真核細胞對蛋白翻譯后的進一步修飾。而采用抗原基因轉移制備DC瘤苗有望克服上述不足。
??? 在基因轉移載體的選擇上，除了要求抗原基因能成功轉移外，還要能長期穩定表達，所以本研究選擇腺相關病毒（AAV）為載體，AAV可成功轉導DC，并特異整合于人19號染色體上，從而實現轉移基因的長期穩定表達[5]，我們的前期研究結果充分說明了的BA46基因能成功轉移DC，并有明確的表達[4]。采用基因轉移制備DC，除了保證抗原基因的成功轉移和表達外，還要考慮基因轉移后對DC成熟及功能的影響。本研究發現，以AAV 為載體轉移抗原基因BA46至DC前體細胞后，不會影響DC的成熟，在常規外源性細胞因子GM-CSF和IL-4的作用下，第7 天的DC即呈現典型的DC形態，外形不規則，細胞表面有大量長短不一的樹突。在功能方面，共刺激因子CD80、CD86、CD40是DC功能的重要標志，而基因轉移組DC 在這三組細胞表面標志均有很高比例的表達，且明顯高于對照組(采用細胞裂解物刺激制備)的DC。
??? DC的功能最重要的體現是誘導T細胞，本研究采用基因轉移制備的DC所誘導的T細胞在CD8＋比較明顯高于對照組T 細胞，這可能與抗原遞呈途徑有關，采用基因轉移制備DC 的方法，由于抗原基因已整合于細胞的染色體內，抗原的遞呈途徑主要是采用內源途徑，因此主要誘導CD8＋的T細胞。在功能試驗(殺傷效率)上，基因轉移組T 細胞對抗原陽性的靶細胞的殺傷明顯好于對照組T 細胞，而且此殺傷有MHC限制性和明顯的抗原特異性。
??? 采用基因轉移的方法，成功制備表達乳腺癌抗原BA46的DC，并誘導具有強大特異殺傷功能的T細胞，為以BA46為靶抗原的乳腺癌DC療法打下基礎。
??? 參考文獻(略)
編輯: blue 作者:丁香園通訊員
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