酶聯(lián)免疫競爭法測定小分子藥物時的酶標(biāo)記物
發(fā)布日期：2009-03-26 13:40 文章來源：丁香園
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關(guān)鍵詞： 酶聯(lián)免疫競爭法
小分子藥物
酶標(biāo)記物
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隨著政府對食品安全的檢測額重視程度，越來越多的藥物殘留小分子檢測試劑盒出現(xiàn)，酶聯(lián)免疫競爭法試劑盒是其中的主力軍，在采用酶聯(lián)免疫競爭法檢測小分子藥物的模式中常用的方法有：
1. 包被抗原，酶標(biāo)二抗進(jìn)行的間接競爭法，該方法的好處在于對第一抗體不存在操作影響（沒有認(rèn)為的進(jìn)行標(biāo)記或其他處理），一抗活性好，并且抗原的包被一般不會出現(xiàn)過量包被造成IC50值較高，靈敏度降低的情況！但是該方法需要進(jìn)行兩次洗板操作過程麻煩，并且陰性O(shè)D值一半不會很高，多在2.0以下！線型范圍較小，精確度較低！
2. 包被抗原，酶標(biāo)一抗進(jìn)行的標(biāo)記抗體直接競爭法，該方法的好處在于操作簡單，一步完成，包被一般不會出現(xiàn)過量包被造成IC50值較高，并且游離的抗原更容易和標(biāo)記的抗體進(jìn)行反應(yīng)，靈敏度和精確度較高，陰性顯色多在3.0以上。但是對于一抗進(jìn)行標(biāo)記難度較大，標(biāo)記和后期純化需要花費(fèi)功夫！
3. 包被抗體，標(biāo)記抗原進(jìn)行的標(biāo)記抗原直接競爭法，該方法的好處在于操作簡單，一步完成，由于標(biāo)記的抗原帶有HRP相對游離的抗原與包被的抗體更容易結(jié)合，并且小分子標(biāo)記后容易純化分離，沒有偶聯(lián)的小分子通過透析即可除去，并且包被一抗對抗體的活性沒有明顯影響！但是該方法采用包被抗體的方法很容易造成包被過量影響IC50值，并且小分子的標(biāo)記通常不能采用經(jīng)典的過碘酸鈉法，需要采用其他的化學(xué)方法，EDC。NHSEDC等，對酶的活性有一定的影響。
個人通過近期一些實(shí)驗(yàn)證明，直接競爭法IC50和線型范圍明顯優(yōu)于間接競爭法，標(biāo)記抗原和標(biāo)記抗體相對來說標(biāo)記抗原要稍好一些，關(guān)鍵在于后期純化方便！拋磚引玉！！！希望大家能夠針對此問題進(jìn)行專題討論！重點(diǎn)在于抗原抗體的標(biāo)記，以及抗原的合成改造！
編輯: ludongcn 作者:lzsgxl
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